Storage conditions and terms of lyophilized poly- and monoclonal antitoxic peroxidase conjugates

Main Article Content

Ольга Александровна Якушева
Lyudmila P. Alekseeva
Veronika V. Evdokimova
Vera P. Zyuzina
Mikhail E. Yagovkin

Abstract

The article discusses the selection of optimal conditions for the lyophilization of poly- and monoclonal peroxidase conjugates used in the direct version of the enzyme immunoassay intended for the cholera toxin detection in Vibrio cholerae O1, O139 strains. Effective stabilizers included in protective media comprise 1 % sucrose, 1 % sodium thiosulfate, 0.5 % egg albumin, or 0.5 % bovine serum albumin. Their use increases the shelf life, increases stability, and contributes to the preservation of high sensitivity and specificity of poly- and monoclonal peroxidase conjugates. Evaluation of the serological activity of antitoxic conjugates in ELISA after lyophilization in a protective medium with stabilizers showed that it remains at the initial level. The results of testing lyophilized conjugates during storage allow us to speak about the possibility of their use for two years without changing the main indicators.

Article Details

How to Cite
Якушева, О. А. ., Alekseeva Л. П. ., Evdokimova В. В. ., Zyuzina В. П. ., & Yagovkin М. Э. . (2022). Storage conditions and terms of lyophilized poly- and monoclonal antitoxic peroxidase conjugates. Bulletin of Perm University. Biology, (4), 300–308. https://doi.org/10.17072/1994-9952-2022-4-300-308
Section
Микробиология
Author Biographies

Ольга Александровна Якушева, Rostov-on-Don Anti-Plague Institute, Rostov-on-Don, Russia

Research associate

Lyudmila P. Alekseeva, Rostov-on-Don Anti-Plague Institute, Rostov-on-Don, Russia

Doctor of biology, professor

Veronika V. Evdokimova , Rostov-on-Don Anti-Plague Institute, Rostov-on-Don, Russia

Сandidate of biology, researcher

Vera P. Zyuzina , Rostov-on-Don Anti-Plague Institute, Rostov-on-Don, Russia

Candidate of biology, senior researcher

Mikhail E. Yagovkin, Rostov-on-Don Anti-Plague Institute, Rostov-on-Don, Russia

Research associate

References

Алексеева Л.П. и др. Современные методические приемы очистки холерного токсина // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2019. Т. 15, № 1. С. 5–9.

Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз, 1962. 180 с.

Загоскина Т.Ю. и др. Совершенствование тест-системы для скрининга материала на ботулотоксин в дот-иммуноанализе // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра Сибирского отделения РАМН. 2015. Т. 101, № 1. С. 60–62.

Куклина Г.В. и др. Разработка иммуноферментной тест-системы для обнаружения Legionella pneu-mophila серогруппы 1 // Проблемы особо опасных инфекций. 2011. Вып. 110. С. 61–64.

Кытманов А.А. и др. Разработка иммуноферментных моноклональных тест-систем для выявления возбудителей сапа и мелиоидоза // Проблемы особо опасных инфекций. 2018. Вып. 3. С. 60–65. doi: 10.21055/0370-1069-2018-3-60-65.

Пат. RU2232190C2 Российская Федерация, МПК C12N9/08 C12N9/96 A61K39/00. Композиция для хранения водных растворов конъюгатов или антител с пероксидазой хрена / Н.А. Игнатова, А.П. Осипов; патентообладатель ЗАО Иммунотех. – заявл. 22.06.2001; опубл. 10.07.2004.

Пат. RU216.013.4820 Российская Федерация. Способ консервации иммунопероксидазного конъю-гата / А.А. Зайцев, О.А. Гнусарева, С.А. Курчева и др.; патентообладатель Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт. – № 0002549971; опубл. 10.05.2015.

Пирожков А.П. и др. Стабилизация пероксидазных конъюгатов, используемых в иммунофермент-ных тест-системах для выявления антигенов вирусов Эбола и Марбург // Вопросы вирусологии. 2010. № 1. С. 45–48.

Шаморова Н.А. Стабилизация конъюгата тироксин-пероксидаза аммониевой солью 8-анил-инонафтил-1-сульфокислоты // Биотехнология. 2009. № 5. С. 90–93.

Якушева О.А. и др. Характеристика и оценка диагностической значимости поли- и моноклональных пероксидазных конъюгатов к холерному токсину // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2020а. Т. 16, № 2. С. 37–43.

Якушева О.А. и др. Оптимизация условий постановки прямого варианта дот-иммуноанализа для детекции холерного токсина // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчин-никова. 2020б. Т. 16, № 3. С. 25–31.

Bayat M., Khabiri A., Hemati B. Development of IgY-Based Sandwich ELISA as a Robust Tool for Rapid Detection and Discrimination of Toxigenic Vibrio cholerae // Can. J. Infect. Dis. Med. Microbiol. 2018. doi: 10.1155/2018/4032531.

Gubala A.J., Proll D.F. Molecular-beacon multiplex real-time PCR assay for detection of Vibrio cholerae // Appl. Environ. Microbiol. 2006. Vol. 72, №. 9. P. 6424–6428. doi: 10.1128/AEM.02597-05.

Iwanaga M., Kuyyakanond T. Large production of cholera toxin by Vibrio cholerae O1 in yeast extract peptone water // Journal of Clinical Microbiology. 1987. Vol. 25, № 1. P. 2314–2316.

Izumiya H. et al. Development of a loop mediated isothermal amplification assay for Vibrio cholerae O1 and O139 // Molecular and Cellular Probes. 2019. Vol. 45. P. 65–67. doi: 10.1016/j.mcp.2019.05.001.

Kerketta A.S., Kar S.K., Khuntia H.K. Detection of Haitian ctxB7 & tcpA alleles in Vibrio cholerae O1 El Tor biotype in Puri, Odisha, India // Indian J. Med. Res. 2019. Vol. 149, №. 4. P. 558–560. doi: 10.4103/ijmr.IJMR_1130_17.

Kim E.J. et al. Molecular Insights Into the Evolutionary Pathway of Vibrio cholerae O1 Atypical El Tor Variants // PLoS Pathog. 2014. Vol. 10, № 9. doi: 10.1371/journal.ppat.1004384.

Kim E.J. et al. Whole-genome sequence comparisons reveal the evolution of Vibrio cholerae O1 // Trends in Microbiology. 2015. Vol. 23, № 8. P. 479–489. doi: 10.1016 / j.tim.2015.03.010.

Koskela K.A. et al. A multiplatform real-time polymerase chain reaction detection assay for Vibrio cholerae // Diagnostic microbiology and infectious disease. 2009. Vol. 65, № 3. P. 339–344.

Lyon W.J. TaqMan PCR for detection of Vibrio cholerae O1, O139, non-O1, and non-O139 in pure cul-tures, raw oysters, and synthetic seawater // Appl. Environ. Microbiol. 2001. Vol. 67, № 10. P. 4685–4693. doi: 10.1016/j.diagmicrobio.2009.07.009.

Meza-Lucas A. et al. Comparison of DOT-ELISA and Standard-ELISA for Detection of the Vibrio cho-lerae Toxin in Culture Supernatants of Bacteria Isolated from Human and Environmental Samples // Indian J. Microbiol. 2016. Vol. 56, № 3. P. 379–382. doi: 10.1007/s12088-016-0596-2 .

Safa A., Nair G.B., Kong R.Y.С. Evolution of new variants of Vibrio cholerae O1 // Trends Microbiol. 2010. Vol. 18, № 1. P. 46–54. doi: 10.1016/j.tim.2009.10.003.

Tuteja U. et al. Simultaneous direct detection of toxi-genic and non-toxigenic Vibrio cholerae from rec-tal swabs and environmental samples by sandwich ELISA // J. Med. Microbiol. 2007. Vol. 56, № 10. P. 1340–1345. doi: 10.1099/jmm.0.47166-0.

Most read articles by the same author(s)