Твердофазный иммуноферментный анализ (прямой вариант) для выявления токсигенных холерных вибрионов О1, О139 серогрупп

##plugins.themes.bootstrap3.article.sidebar##

pdf
Опубликован: дек 23, 2022
DOI: https://doi.org/10.17072/1994-9952-2022-4-280-287
Ключевые слова:
холерный токсин поликлональный и моноклональный пероксидазные конъюгаты иммуноферментный анализ лабораторная диагностика холеры

##plugins.themes.bootstrap3.article.main##

Людмила Павловна Алексеева
Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия
https://orcid.org/0000-0002-9866-3579
Ольга Александровна Якушева
Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия
https://orcid.org/0000-0001-8159-7547
Вероника Вячеславовна Евдокимова
Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия
https://orcid.org/0000-0001-5522-9097
Михаил Эдуардович Яговкин
Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия
https://orcid.org/0000-0001-8414-4965
Вера Павловна Зюзина
Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия
https://orcid.org/0000-0003-3100-0049

Аннотация

В результате проведённых исследований оптимизирован метод прямого твёрдофазного иммуноферментного анализа (ТИФА) для выявления токсигенных штаммов холерных вибрионов О1, О139 серогрупп на основе моноклональных и поликлональных антитоксических иммуноглобулиновых пероксидазных конъюгатов. Установлены оптимальные параметры его постановки: сенсибилизация планшета токсинсодержащими препаратами, разведёнными в фосфатно-солевом буфере (ФСБ) рН 7.4 до титра 1:2–1:4, их адсорбция на твёрдой фазе планшета в течение 2 ч. при 37°С, блокировка свободных сайтов связывания 1%-ным раствором бычьего сывороточного альбумина (БСА) – 30 мин. (37°С), время контакта исследуемого образца с моно- или поликлональным пероксидазными конъюгатами – 30 мин. (37°С). Испытания на гомологичных и гетерологичных штаммах показали высокую специфичность иммуноферментного анализа и возможность его использования для обнаружения токсигенных холерных вибрионов.

##plugins.themes.bootstrap3.article.details##

Как цитировать
Алексеева, Л. П. ., Якушева , О. А. ., Евдокимова, В. В. ., Яговкин, М. Э. ., & Зюзина, В. П. . (2022). Твердофазный иммуноферментный анализ (прямой вариант) для выявления токсигенных холерных вибрионов О1, О139 серогрупп. Вестник Пермского университета. Серия Биология, (4), 280–287. https://doi.org/10.17072/1994-9952-2022-4-280-287
Выпуск
№ 4 (2022): Вестник Пермского университета. Серия Биология
Раздел
Микробиология

Лицензионный договор на право использования научного произведения в научных журналах, учредителем которых является Пермский государственный национальный исследовательский университет

Скачать лицензионный договор

Текст Договора размещен на сайте Пермского государственного национального исследовательского университета http://www.psu.ru/, а также его можно получить по электронной почте в «Отделе научных периодических и продолжающихся изданий ПГНИУ»: YakshnaN@psu.ru или в редакциях научных журналов ПГНИУ.

Биографии авторов

Людмила Павловна Алексеева, Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия

Д-р биол. наук, профессор

Ольга Александровна Якушева , Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия

Научный сотрудник

Вероника Вячеславовна Евдокимова, Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия

Канд. биол. наук, науч. сотрудник

Михаил Эдуардович Яговкин, Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия

Научный сотрудник

Вера Павловна Зюзина, Ростовский-на-Дону противочумный институт, г. Ростов-на-Дону, Россия

Канд. биол. наук, старший науч. сотрудник

Библиографические ссылки

Алексеева Л.П. и др. Современные методические приемы очистки холерного токсина // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2019. Т. 15, № 1. С. 5–9.

Ашмарин И.П. Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Л.: Медгиз, 1962. 180 с.

Баранова Е.В. и др. Конструирование иммунохроматографического теста на основе моноклональ-ных антител для выявления холерного токсина // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии имени Ю.А. Овчинникова. 2020. Т. 16, № 2. С. 18–27.

Егоров А.М. Теория и практика иммуноферментного анализа. М.: Высш. шк., 1991. 288 с.

Курчева С.А. и др. Разработка диагностической тест-системы для выявления специфических анти-тел к возбудителю бруцеллеза в непрямом методе иммуноферментного анализа // Современные пробле-мы науки и образования. 2016. № 2. URL: http://www.science-education.ru/ru/article/view?id=24244.

Михеева Е.А. и др. Получение и характеристика антителопродуцирующих гибридом и моноклональных иммуноглобулинов к энетеротоксину Vibrio cholerae // Биотехнология. 2014. Т. 30, № 3. С. 49–54.

Петрова Е.Э. и др. Получение и характеристика моноклональных антител к холерному токсину // Биоорганическая химия. 2009. Т. 35, № 3. С. 357–367.

Шашкова А.В. и др. Фенотипический и молекулярно-генетический анализ генетически измененного токсигенного штамма V. cholerae 301 биовара Эль Тор, изолированного в 2011 г. в России // Проблемы особо опасных инфекций. 2011. № 14. С. 61–64.

Якушева О.А. и др. Характеристика и оценка диагностической значимости поли и моноклональ-ных пероксидазных конъюгатов к холерному токсину // Вестник биотехнологии и физико-химической биологии им. Ю.А. Овчинникова. 2020. Т. 16, № 2. С. 37-43.

Ahn-Yoon S. et al. Ganglioside-liposome immunoassay for the ultrasensitive detection of cholera toxin // Analytical Chemistry. 2003. Vol. 75, № 10. P. 2256–2261. doi: 10.1021/ac026428t.

Bayat M. et al. Corrigendum to "Development of IgY-Based Sandwich ELISA as a Robust Tool for Rap-id Detection and Discrimination of Toxigenic Vibrio cholera // Canadian Journal of Infectious Diseases and Medical Microbiology. 2019. doi: 10.1155/2019/4164982.

Crowther John R. Molecular Biology Techniques, ELISA Guide. Second edition. Humana Press, part of Springer Science + Business Media, LLC 2009.

Greig D.R. et al. A real-time multiplex PCR for the identification and typing of Vibrio cholerae // Diag-nostic Microbiology and Infectious Disease. 2018. Vol. 90, № 3. P. 171–176. doi: 10.1016/j.diagmicrobio.

Hossain Z.Z. et al. Quantitative Analysis of Nucleic Acid Extraction Methods for Vibrio cholerae Using Real-time PCR and Conventional PCR // Mymensingh Medical Journal. 2018. Vol. 27, № 2. P. 327–335.

Iwanaga M., Kuyyakanond T. Large production of cholera toxin by Vibrio cholerae O1 in yeast extract peptone water // Journal of Clinical Microbiology. 1987. Vol. 25, № 1. P. 2314–2316.

Jin D. et al. Quantitative detection of Vibrio cholera toxin by real-time and dynamic cytotoxicity moni-toring // Journal of Clinical Microbiology. 2013. Vol. 51, № 12. P. 3968–3974. doi: 10.1128/JCM.01959-13.

Mehrabadi J.F. et al. Detection of toxigenic Vibrio cholerae with new multiplex PCR // Journal of Infec-tion and Public Health. 2012. Vol. 5, № 3. P. 263–267. doi: 10.1016/j.jiph.2012.02.004.

Meza-Lucas A. et al. Comparison of DOT-ELISA and Standard-ELISA for Detection of the Vibrio cho-lerae Toxin in Culture Supernatants of Bacteria Isolated from Human and Environmental Samples // Indian Journal of Microbiology. 2016. Vol. 56, № 3. P. 379–382. doi: 10.1007/s12088-016-0596-2.

Shlyapnikov Y.M. et al. Rapid simultaneous ultrasensitive immunodetection of five bacterial toxins. // Analytical Chemistry. 2012. Vol. 84, № 13. P. 5596–6603. doi: 10.1021/ac300567f.

Tuteja U. et al. Simultaneous direct detection of toxigenic and non-toxigenic Vibrio cholerae from rectal swabs and environmental samples by sandwich ELISA // Journal of Medical Microbiology. 2007. Vol. 56, № 10. P. 1340–1345. doi: 10.1099 / jmm.0.47166-0.

Наиболее читаемые статьи этого автора (авторов)